نکات کاربردی

دلایل احتمالی

• حرارت دهی بیش از حد و سوختن ترکیبات محیط از جمله قندها

رفع اشکال

• تنظیم حرارت و زمان حرارت دهی، برای مثال محیط های دارای گلوکز بالا مانند MRS به هیچ وجه حرارت های طولانی اتوکلاوهای غیراستاندارد را تحمل نکرده و کارامله می شوند.

دلایل احتمالی

• حل نشدن کامل آگار محیط
• تنظیم نبودن pH محیط
• افزودن محلول ها به محیط
• توزین نامناسب

رفع اشکال

• از حل شدن آگار مطمئن شوید.
• بعد از اتوکلاو محیط را اندکی هم بزنید.
• در محیط های غیراتوکلاوی، با حرارت غیرمستقیم به طور کامل آگار را حل کنید. وجود دانه های ریز چسبیده به ظرف نشان از حل نشدن کامل آگار است.
• بالا یا پایین بودن pH تاثیر جدی در قوام محیط آگاردار دارد، از تنظیم بودن pH مطمئن شوید.
• حجم محلول های افزودنی به محیط را در تهیه محیط ها لحاظ کنید، به نحوی که پس از افزودن این حجم، حجم نهایی بدست آید.
• از توزین درست و دقیق پودر خود مطمئن شوید، ترازو باید کالیبر باشد و مقادیر وزن شده نیز درست باشند.

دلایل احتمالی

• وجود رطوبت و گرما در محل نگهداری محیط
• باز بودن کامل یا ناقص درب قوطی
• محیط های بسیار آبدوست مانند XLD Agar

رفع اشکال

• محیط را در جای خشک و خنک نگهداری کنید.
• از بستن کامل درب قوطی بلافاصله پس از توزین مطمئن شوید.
• علاوه بر رعایت موارد بالا، بهتر است در حجم های حداقلی تهیه شوند و طولانی مدت نگهداری نشوند.

ضروری است که بلافاصله پس از تحویل گرفتن محیط، شرایط فیزیکی آن را کنترل کنید! در صورت وجود اشکال بلافاصله با شرکت تماس بگیرید.

دلایل احتمالی

• تنظیم نبودن pH محیط
• تغییر ترکیبات محیط
• استفاده از مکمل ها و آنتی بیوتیک های نامناسب
• غیرفعال بودن یا مرده بودن سوش های هدف
• تلقیح باکتری ها در دمای بالا

رفع اشکال

• با استفاده از سوش های استاندارد، عملکرد محیط های کشت را در هنگام دریافت کنترل کنید.
• pH محیط را پس از اتوکلاوکنترل کنید.
• از حرارت دهی زیاد اجتناب کنید.
• از درستی عملکرد مکمل ها و آنتی بیوتیک های مورد استفاده مطمئن شوید.
• مکمل ها و آنتی بیوتیک ها را از شرکت های معتبر تهیه کنید.
• دوزهای مناسب، نه بالای، مواد مهارکنندی افزودنی را استفاده کنید.
• ساپلمنت های ضروری رشد را از نظر عملکرد کنترل کنید.
• از زنده بودن سوش ها اطمینان حاصل کنید، برای مثال از کشت تازه استفاده کنید. فریز کردن مکرر سوش ها منجر به مرگشان می شود.
• لوپ کشت، استریل و خنک باشد.
• حجم مناسب باکتری را تلقیح کنید.
• در مورد نمونه های محیطی مانند خاک و یا خون و … از عدم آلودگی به مواد بازدارنده رشد مانند آنتی بیوتیک ها و فلزات سنگین مطمئن شوید.
• اغلب بهتر است سوش ها در دمای اتاق، ۲۵ درجه سانتی گراد، به محیط اضافه شوند.

دلایل احتمالی

• حل نشدن کامل ترکیبات از جمله آگار
• استفاده از آب نامناسب جهت ساخت محیط
• حرارت دیدن بیش از حد محیط
• استفاده از ظروف و وسایل آماده سازی آلوده
• توزین نامناسب و استفاده از مقادیر بیش از آنچه در برچسب محصول ذکر شده

رفع اشکال

• قبل از اتوکلاو، محیط را به طور کامل در آب حل کنید.
• از آب مقطر مطمئن از نظر pH و املاح استفاده کنید (املاح و pH نامناسب آب می تواند منجر به کدورت محیط ها شود).
• از کالیبر بودن اتوکلاو مطمئن شوید. پس از تکمیل فرایند، از نگهداری محیط در اتوکلاو جدا خودداری کنید.
• از تمیز بودن کامل شیشه آلات و وسایل مورد استفاده در محیط سازی مطمئن شوید.
• از کالیبر بودن ترازو و درستی شرایط و مقدار توزین پودر مطمئن شوید.