Eosin Methylene Blue (EMB) Agar (Levin) | ائوزین متیلن بلو

کاربرد: محیط کشت انتخابی و افتراقی برای جداسازی باکتری های روده ای گرم کنفی

استانداردها: APHA, USP

شماره کاتالوگ: i23068

توضیحات

آماده سازی محیط

  • قوطی محیط کشت ائوزین متیلن بلو را به خوبی تکان دهید. مقدار ۳۶ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کنید.
  • به آرامی حرارت داده و به مدت چند ثانیه بجوشانید تا محیط بطور کامل حل شود.
  • محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
  • محیط را تا ۶۰ خنک کنید و به خوبی تکان دهید تا هم متیلن بلو داخل محیط اکسیده شود (یعنی رنگ آبی خود را بازیابد) و هم رسوب داخل محیط، که بخش مهمی از محیط است، دوباره شناور شود.
  • محیط را در پلیت پخش کنید.

شرایط نگهداری 

پودر محیط داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی گراد و محیط آماده در لوله در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.

آزمایش

آزمایش

فرآیند آزمایش

  • نمونه­ ها را به روش اسپردینگ در سطح پلیت تلقیح کنید.
  • پلیت ها را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتی گراد گرماگذاری کنید. از تابش نور به پلیت ها جلوگیری کنید. چنانچه نتایج کشت پس از ۲۴ ساعت منفی بود، پلیت ها را مجددا به مدت ۲۴ ساعت دیگر گرماگذاری کنید.

نتیجه و تفسیر

کلیفرم ها از جمله باکتری های گرم منفی تخمیر کننده لاکتوز هستند که به علت شرایط اسیدی که در اثر رشد و تخمیر قند توسط آنها در محیط EMB بوجود می آید، موجب واکنش رنگ ها شده که باعث ایجاد جلای فلزی سبز رنگ در کلنی هایشان می شوند.

خصوصیات تیپیک ظاهری برخی از کلیفرم ها به شرح زیر می باشد:

باکتری Escherichia coli دارای کلنی های  بزرگ آبی-سیاه با جلای فلزی می باشد.

باکتری های Enterobacter/ Klebsiella کلنی های بزرگ و موکوئیدی به رنگ آبی – سیاه تولید می کنند.

باکتری های Proteus، Salmonella و Shigella دارای کلنی های بزرگ و بی رنگ می باشند.

باکتری Pseudomonas کلنی هایی با اشکال نامنظم و بی رنگ خواهند داشت.

نکات

  • برخی از سویه­ های سالمونلا و شیگلا، به دلیل حضور ائوزین و متیلن بلو در ترکیب این محیط، رشد نمی کنند.
  • برخی از سویه های باکتری های گرم مثبت مانند انتروکوک ها، استافیلوکوک ها و مخمر ها می­توانند بر روی این محیط کشت رشد کرده و کلنی های سرسوزنی تولید کنند.
  • باکتری های غیر بیماریزای غیر تخمیر کننده لاکتوز نیز ممکن است بتوانند برروی این محیط رشد کنند. بنابراین برای شناسایی دقیق تر این ارگانیسم ها از سویه های بیماری زا بایستی از برخی از تست های بیوشیمیایی نیز استفاده کرد.
پرسش و پاسخ

شما نیز میتوانید سوالات خود را ثبت کنید!

اگر سوالی در مورد محصول دارید از این قسمت بپرسید!

کنترل کیفی

کنترل کیفی

  • ظاهر پودر: پودری، یکدست و به رنگ صورتی- قرمز که ممکن است دانه های قرمز رنگی همراه داشته باشد.
  • ظاهر محیط آماده: کمی کدر و به رنگ سبز نارنجی قهوه ای.
  • نتیجه­ کشت باکتری در شرایط بی­ هوازی پس از گرماگذاری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت
جلای فلزی رنگ کلنی رشد ATCC سوش استاندارد
+
آبی
خوب / خیلی خوب
25922
Escherichia coli
+
آبی
خوب / خیلی خوب
11775
Escherichia coli
-
آبی کمرنگ
خوب / خیلی خوب
13047
Enterobacter cloacae
-
-
خوب / خیلی خوب
11060
Shigella sonnei
-
-
خوب / خیلی خوب
14028
Salmonella typhimurium
-
-
رشد ضعیف/ عدم رشد
25923
Staphylococcus aureus
مواد تشکیل دهنده
گرم بر لیتر ترکیبات
10.0
Peptones
10.0
Lactose
2
Di-potassium Hydrogen Phosphate
0.4
Eosin Y (yellowish)
0.065
Methylene Blue
13.5
Agar
0.2 ± 7.0
Final pH
توضیحات

آماده سازی محیط

  • قوطی محیط کشت ائوزین متیلن بلو را به خوبی تکان دهید. مقدار ۳۶ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کنید.
  • به آرامی حرارت داده و به مدت چند ثانیه بجوشانید تا محیط بطور کامل حل شود.
  • محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
  • محیط را تا ۶۰ خنک کنید و به خوبی تکان دهید تا هم متیلن بلو داخل محیط اکسیده شود (یعنی رنگ آبی خود را بازیابد) و هم رسوب داخل محیط، که بخش مهمی از محیط است، دوباره شناور شود.
  • محیط را در پلیت پخش کنید.

شرایط نگهداری 

پودر محیط داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی گراد و محیط آماده در لوله در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.

آزمایش

آزمایش

فرآیند آزمایش

  • نمونه­ ها را به روش اسپردینگ در سطح پلیت تلقیح کنید.
  • پلیت ها را به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتی گراد گرماگذاری کنید. از تابش نور به پلیت ها جلوگیری کنید. چنانچه نتایج کشت پس از ۲۴ ساعت منفی بود، پلیت ها را مجددا به مدت ۲۴ ساعت دیگر گرماگذاری کنید.

نتیجه و تفسیر

کلیفرم ها از جمله باکتری های گرم منفی تخمیر کننده لاکتوز هستند که به علت شرایط اسیدی که در اثر رشد و تخمیر قند توسط آنها در محیط EMB بوجود می آید، موجب واکنش رنگ ها شده که باعث ایجاد جلای فلزی سبز رنگ در کلنی هایشان می شوند.

خصوصیات تیپیک ظاهری برخی از کلیفرم ها به شرح زیر می باشد:

باکتری Escherichia coli دارای کلنی های  بزرگ آبی-سیاه با جلای فلزی می باشد.

باکتری های Enterobacter/ Klebsiella کلنی های بزرگ و موکوئیدی به رنگ آبی – سیاه تولید می کنند.

باکتری های Proteus، Salmonella و Shigella دارای کلنی های بزرگ و بی رنگ می باشند.

باکتری Pseudomonas کلنی هایی با اشکال نامنظم و بی رنگ خواهند داشت.

نکات

  • برخی از سویه­ های سالمونلا و شیگلا، به دلیل حضور ائوزین و متیلن بلو در ترکیب این محیط، رشد نمی کنند.
  • برخی از سویه های باکتری های گرم مثبت مانند انتروکوک ها، استافیلوکوک ها و مخمر ها می­توانند بر روی این محیط کشت رشد کرده و کلنی های سرسوزنی تولید کنند.
  • باکتری های غیر بیماریزای غیر تخمیر کننده لاکتوز نیز ممکن است بتوانند برروی این محیط رشد کنند. بنابراین برای شناسایی دقیق تر این ارگانیسم ها از سویه های بیماری زا بایستی از برخی از تست های بیوشیمیایی نیز استفاده کرد.
پرسش و پاسخ

شما نیز میتوانید سوالات خود را ثبت کنید!

اگر سوالی در مورد محصول دارید از این قسمت بپرسید!

کنترل کیفی

کنترل کیفی

  • ظاهر پودر: پودری، یکدست و به رنگ صورتی- قرمز که ممکن است دانه های قرمز رنگی همراه داشته باشد.
  • ظاهر محیط آماده: کمی کدر و به رنگ سبز نارنجی قهوه ای.
  • نتیجه­ کشت باکتری در شرایط بی­ هوازی پس از گرماگذاری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت
جلای فلزی رنگ کلنی رشد ATCC سوش استاندارد
+
آبی
خوب / خیلی خوب
25922
Escherichia coli
+
آبی
خوب / خیلی خوب
11775
Escherichia coli
-
آبی کمرنگ
خوب / خیلی خوب
13047
Enterobacter cloacae
-
-
خوب / خیلی خوب
11060
Shigella sonnei
-
-
خوب / خیلی خوب
14028
Salmonella typhimurium
-
-
رشد ضعیف/ عدم رشد
25923
Staphylococcus aureus
مواد تشکیل دهنده
گرم بر لیتر ترکیبات
10.0
Peptones
10.0
Lactose
2
Di-potassium Hydrogen Phosphate
0.4
Eosin Y (yellowish)
0.065
Methylene Blue
13.5
Agar
0.2 ± 7.0
Final pH

CoA & MSDS files

Downloading CoA & MSDS files

 
 

:To download the CoA file

Enter the LOT number printed on the container

:To download the MSDS file

Enter the catalog number (REF) printed on the container without the hyphen