توضیحات
باکتری های تولیدکننده اسلایم، به گروهی از باکتری ها گفته می شود که می توانند حتی بدون نیاز به تجمع آهن نیز اسلایم تولید کنند. به همین دلیل اسلایم های تولیدشده توسط این باکتری ها با رنگ های زرد، قرمز و قهوه ای که اغلب توسط IRBها تولید می شود، دیده نمی شوند. برخی از باکتری های IRB هم توانایی تولید اسلایم را دارند. اسلایم تولید شده توسط باکتری های IRB به دلیل تجمع آهن نامحلول، معمولا متراک متر است.
این باکتری ها هم در شرایط هوازی و هم بی هوازی قادر به تولید اسلایم هستند اما معمولا در شرایط هوازی (اکسیداسیون)، ساختار تولید شده تراکم بیشتری را نشان می دهد.
اکثر باکتری ها می توانند ساختارهای اسلایم مانند تولید کنند. این ساختار ها معمولا متشکل از پلیمرهای اگزوپلیساکارید هستند. این مواد پلیمری خارج سلولی (EPS) با استفاده از فعالیت های آنزیمی بر روی کربوهیدرات ها ساخته می شوند. اسلایم ها علاوه بر اینکه سلول ها را به هم متصل می کنند، حجم زیادی آب را نیز به دام می اندازند. درواقع بین 95 تا 99% از حجم اسلایم از آب تشکیل شده است.
درصورتی که شرایط محیطی سخت باشد مثلا مواد غذایی کمی در محیط موجود باشد، لایه های اسلایم تشکیل شده، ضخیم تر و متراکم تر خواهند بود. درواقع به نظر می رسد این ساختارها، برای باکتری ها نقش محافظتی داشته باشد. همچنین می تواند برخی مواد شیمیایی را نیز جذب کند.
بسیاری از باکتری های تولیدکننده اسلایم می توانند پیگمنت های رنگی نیز تولید کنند. این اسلایم ها معمولا با رنگ های سفید، خاکستری، زرد یا بژ دیده می شوند. رنگ قرمز در صورت حضور باکتری Serratia marcescens و رنگ بنفش نیز درصورت حضور Chromobacterium یا سویه های Janthinobacterium تشکیل می شود. رنگ سیاه مشخصه تولید سولفید آهن یا کربنات ها است که اغلب با حضور ترکیبی از باکتری های روده ای در نمونه همراه است.
باکتری های تولید کننده اسلایم می توانند مشکلات بسیار جدی در ساختارها ایجاد کنند. زیرا رشد آنها با کاهش هدایت الکترولیکی یا حرارتی و کاهش کیفیت آب همراه است. رشد آنها با افزایش کدورت و تغییر در طعم، بو یا رنگ آب دنبال می شود.
تست کیت MicrobCheckTM Slime می تواند حضور یا عدم حضور باکتری های تولیدکننده اسلایم را مشخص کند. همچنین با توجه به روز شروع واکنش تشکیل اسلایم می تواند تخمینی از جمعیت تقریبی باکتری های تولید کننده اسلایم را نیز ارائه دهد.
تست کیت MicrobCheckTM Slime به صورت یک فالکون 50 میلی لیتری حاوی محیط کشت و گوی شناور طراحی شده است.
تاریخ انقضا: ۶ ماه پس از تولید
شرایط نگهداری: در دمای ۸-۴ درجه سانتی گراد و به دور از نور مستقیم خورشید و از یخ زدگی اسلایدها جلوگیری شود.
کار با کیت
کار با کیت
آماده سازی
حداقل 25 میلی لیتر نمونه را جمع آوری کنید.
مقدار 19 میلی لیتر نمونه را داخل فالکون ریخته و در آن را ببندید.
روی فالکون تاریخ و نام نمونه را یادداشت کنید.
گرماگذاری
فالکون را در دمای اتاق (21 تا 25 درجه سانتی گراد) و به دور از نور خورشید گرماگذاری کنید.
نمونه را هر روز به مدت ۸ روز مشاهده کنید. تاریخ اولین واکنش مشاهده شده را یادداشت کنید.
الگوهای رشد
الگوهای رشد
حضور / عدم حضور
درصورتی که یکی از الگوهای رشد در فالکون مورد آزمایش مشاهده شود، نشان دهنده تست مثبت است. با توجه به نوع الگوی مشاهده شده، می توان درخصوص باکتری های موجود در نمونه فرضیاتی را ارائه داد که در جدول زیر ذکر شده اند.
الگوهای رشد
Dense slime or Gel-Like – DS: در این الگو، اسلایم ها به صورت ساختارهای ژل مانند کروی هستند. ممکن است برای مشاهده بهتر لازم باشد فالکون به آرامی چرخانده شود. در این صورت اسلایم های تهن شین شده به سمت بالا می آیند. شکل این ژ لها با لبه های نامشخص تعریف می شود که به سرعت نیز ته نشین می شوند. در زمان ته نشینی اسلایم، محیط به صورت شفاف دیده می شود. رنگ اسلایم می تواند بژ، سفید یا نارنجی متمایل به زرد باشد.
Slime ring around the ball – SR: حلقه ای از اسلایم با ضخامت mm 5 – 2 در سطح بالای گوی تشکیل می شود. ظاهر آن اغلب موکوییدی است و می تواند به رنگ های سفید، زرد، نارنجی یا بنفش باشد. این حلقه با گذشت زمان متراکم تر و شدیدتر می شود.
Cloudy plates layering – CP: زمانی که جمعیت غالب موجود در نمونه، باکتری های هوازی باشند، رشد اولیه در بخش اکسیداسیون و هوازی رخ می دهد و با رنگ زرد متمایل به قهوه ای دیده می شود. اغلب این ساختارها شبیه به صفحاتی نازک با ضحامت mm 2 – 1 هستند. در این الگو، اگر فالکون کمی تکان داده شود، صفحات برای حفظ موقعیت خود در فالکون، حرکت می کنند. این لایه ها معمولا mm 30 – 15 در زیر سطح مایع دیده می شوند. الگوی CP میتواند گسترش پیدا کند و در تمامی مایع پراکنده شود و الگوی CL را بسازد.
Cloudy growth – CL: محلول درون فالکون به شدت ابری می شود. گاهی اسلایم هایی به دور گوی رشد می کند. گاهی درخششی در بالای فالکون مشاهده می شود. این درخشش ناشی از تولید پیگمنت های فلورسنت توسط سویه های سودوموناس است. این پیگمنت ها با رنگ آبی کمرنگ یا زرد – سبز دیده می شود. این درخشش ممکن است بدون نور UV دیده نشود. درصورتی که در حضور نور UV، درخشش مشاهده شود، احتمالا ناشی از سویه های بالقوه بیماری زا سودوموناس در نمونه باشد. در این صورت تست های تاییدی مورد نیاز است.
Blackened liquid – BL: این واکنش اغلب واکنش دوم یا سوم است. واکنش BL اغلب با محیط کشت شفاف و اغلب بیرنگ و رسوب سیاهرنگ در مخروط کف فالکون یا بر روی دیواره ها مشخص می شود. الگوی BL در این تست اغلب با الگوی BL در تست IRB همراستا است.
Thread-like strands – TH: در این الگو، اسلایم ها بصورت رشته ایی می توانند ساختارهای شبکه مانندی را در محیط مایع تشکیل دهند که از گوی به سمت درون فالکون دیده می شود. این الگو به شدت نادر است.
Pale Blue glow in UV light – PB و Greenish-Yellow glow in UV light – GY: این الگو با تولید فلورسنت با رنگ آبی کمرنگ و زرد – سبز در زیر نور UV مشخص می شود. درصورتی که جمعیت سودوموناس در نمونه بسیار زیاد باشد، علاوه بر مشاهده فلورسنت، حلقه آبیرنگی نیز در اطراف گوی تشکیل می شود.
تخمین جمعیت باکتری
تخمین جمعیت باکتری
چنانچه نتیجه آزمایش مثبت باشد، می توانید جمعیت باکتری و میزان تهاجم آن ها را مطابق با جدول راهنما تخمین بزنید. واکنش سریعتر زمانی رخ می دهد که جمعیت باکتری بالا باشد.
باکتری های تولیدکننده اسلایم رشد تهاجمی بسیار سریعی دارند. محیط استفاده شده در تست کیت MicrobCheckTM Slime نیز بسیار غنی است تا رشد طیف وسیعی از باکتری ها را حمایت کند. با این حال، زمانی که رشد به سرعت رخ ندهد نشان دهنده این است که جمعیت بسیار کمی از باکتری های تهاجمی در نمونه وجود دارد.
