توضیحات
باکتری های بی هوازی احیاکننده سولفات در همه محیط ها یافت می شوند. این باکتری ها در جریان بازیافت نفت، چاه های عمیق، آبسردکن ها، مایعات آبکاری فلزات، مایعات هیدرولیک برپایه آب و صنایع پتروشیمی و جاهایی که محصولات نفتی و آب با هم مخلوط می شوند، یافت می شوند. این میکروب ها در حین رشد باعث ایجاد بود بد هیدروژن سولفات، خوردگی فلزات و سوراخ های بتنی می شوند. بنابراین با ردیابی این میکروارگانیسم ها می توان از بسیاری از خسارات ناشی از آنها جلوگیری نمود. فرآیند MicrobCheckTM SRB test kit براساس رشد در محیط کشت مایع می باشد که تعداد زیادی از SRBها سریع تر از روش APIRP-38 در آن رشد می نمایند.
کار با کیت
کار با کیت
روش کار
- قبل از نمونه گیری روش کار را کامل مطالعه فرمایید.
- بلافاصله پس از نمونه گیری آزمایش را آغاز نمایید.
- با وسایل یا دست غیر استریل نمونه را منتقل ننمایید.
جمع آوری نمونه
- نمونه های نفتی: میکروارگانیسم ها در نبود آب قادر به رشد نمی باشند. در سیستم های محتوی آب و نفت، ارگانیسم ها در فاز بینابینی و فاز آبی یافت می شوند. بنابراین خیلی مهم است که نمونه برداری از این قسمت ها انجام پذیرد. ویال های نمونه برداری باید محتوی نمونه های تازه جمع آوری شده از این فازها و لایه نازکی از روغن معدنی روی سطح نمونه ها باشد. نفت یا روغن اضافه سطح نمونه را می توانید با قطره چکان از روی نمونه بردارید.
- آب و دیگر نمونه ها: روش خاصی برای نمونه گیری آنها توصیه نشده است.
روش استفاده
بررسی حضور / عدم حضور باکتری های SRB
درصورتی که هدف از انجام آزمایش، بررسی حضور و یا عدم حضور باکتری های SRB در نمونه مورد آزمایش می باشد، روش استفاده از کیت به شرح زیر است:
- پس از استریل کردن قسمت درپوش فلزی روی ویال شیشه ای با الکل، آن را برداشته و قسمت زیری را با الکل مجددا استریل نمایید.
- سرنگ را بدون دست زدن به سر سرنگ از پوشش خارج کرده و به سوزن استریل که در پوشش قرار دارد، وصل کرده و محکم کنید. سر سرنگ با هیچ چیز غیر استریلی به غیر از نمونه نباید تماس داشته باشد.
- سوزن سرنگ را از پوشش خارج کرده و از نمونه مورد نظر ۱ میلی لیتر بردارید.
- سوزن سرنگ را به درپوش پلاستیکی شماره ۱ که از قبل با الکل تمیز نموده اید فرو برده و نمونه را به آرامی به شیشه منتقل نمایید.
- برای نتیجه بهتر با سرنگ استریل چند قطره روغن (حدود ۱ میلی لیتر) به نمونه اضافه نمایید تا سطح نمونه را بپوشاند.
- نمونه ها را در یک جعبه سر بسته در دمای اتاق یا در انکوباتور ۳۰-۲۵ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید.
درصورتی که علاوه بر بررسی حضور باکتری های SRB، نیاز به تخمین تعداد تقریبی این باکتری ها می باشد، با رقت سازی به روش زیر آزمایش را انجام دهید:
۱- با یک مارکر شیشه های محتوی محیط کشت را از ۵-۱ شماره گذاری نمایید.
۲- پس از استریل کردن قسمت درپوش فلزی با الکل، آن را برداشته و قسمت زیری را با الکل مجددا استریل نمایید.
۳- سرنگ را بدون دست زدن به سر سرنگ از پوشش خارج کرده و به سوزن استریل که در پوشش قرار دارد وصل کرده و محکم کنید. سر سرنگ با هیچ چیز غیراستریلی به غیر از نمونه نباید تماس داشته باشد.
۴- سوزن سرنگ را از پوشش خارج کرده و از نمونه مورد نظر ۱ میلی لیتر بردارید.
۵- سوزن سرنگ را به درپوش پلاستیکی شیشه شماره ۱ که از قبل با الکل تمیز نموده اید فرو برده و نمونه را به آرامی به شیشه منتقل نمایید.
۶- بدون اینکه سرنگ از درپوش خارج شده باشد، ۱ میلی لیتر از محلول موجود در شیشه را بردارید.
۷- سرنگ را از درپوش خارج نموده و نموده را به شیشه شماره ۲ منتقل نمایید. همانند مرحله ۶ نمونه را مخلوط کنید.
۸- توسط سرنگ، ۱ میلی لیتر از نمونه را به شیشه شماره ۳ منتقل نمایید، همانند مرحله ۶ نمونه را مخلوط کنید.
۹- توسط سرنگ ۱ میلی لیتر نمونه را شیشه شماره ۴ منتقل نمایید. همانند مرحله ۶ نمونه را مخلوط کنید.
۱۰- توسط سرنگ ۱ میلی لیتر از نمونه را به شیشه شماره ۵ منتقل کنید. همانند مرحله ۶ نمونه را مخلوط کنید. سپس ۱ میلی لیتر از نمونه را دور بریزید.
۱۱- برای نتیجه بهتر با سرنگ استریل چند قطره روغن (حدود ۱ میلی لیتر) را به نمونه اضافه کنید تا سطح نمونه را بپوشاند.
۱۲- تمام نمونه ها را در یک جعبه سربسته در دمای اتاق و یا در انکوباتور ۳۰-۲۵ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید. سپس مرحله ۲ را اجرا کنید.
تفسیر نتایج
تفسیر نتایج
پس از گذشت ۲، ۵ و ۱۵ روز نگهداری در انکوباتور، شیشه های تست را با هم مقایسه و نتایج مثبت را ثبت و براساس جدول داده شده تفسیر نمایید. نتایج به دست آمده را به جدول داده شده اضافه و هرگونه تغییری را ثبت نمایید. MicrobCheckTM SRB test kit باکتری های احیاکننده سولفات را جداسازی می نماید. در صورت وجود باکتری های SRB رنگ محلول شیشه های سیاه خواهد شد. وجود نقاط یا خطوط سیاه یا خاکستری دلیل بر وجود SRB نیست و رنگ باید به طور کامل سیاه باشد.
محاسبه تعداد باکتری ها در نمونه
در این تست، از نمونه ها رقت سریالی تهیه شده است، پس بنابر میزان کدورت آن می توان بر طبق چارت این بروشور تعداد باکتری های موجود را تخمین زد.
|
Range of Viable Bacteria per ml of sample or slurry |
Highest Bottle to turn positive |
|
۱ تا ۱۰
|
۱
|
|
۱۰ تا ۱۰۰
|
۲
|
|
۱۰۰۰ تا ۱۰۰۰۰
|
۳
|
|
۱۰۰۰۰۰ تا ۱ میلیون
|
۴
|
|
بیشتر از ۱ میلیون
|
۵
|
