توضیحات
کلیزیست، کیت انتخابی و غنی کننده برای شناسایی همزمان E. coli و کلیفرم ها است. روشی آسان و مطمئن برای شناسایی سریع E. coli و توتال کلیفرم ها در آب، با دقتی برابر با شناسایی یک باکتری هدف در بین 1 میلیون باکتری هتروتروف در 100 میلی لیتر از نمونه آب. دارای سوبسترای کوروموژن و فلوئورسنس که با اتکا به فرآیندهای آنزیمی باکتری های هدف، این محیط را به ابزاری قدرتمند و دقیق برای شناسایی باکتری هدف تبدیل نمونه است.
™Coizist محصولی مقرون به صرفه از نظر زمان و هزینه است زیرا:
- روش استفاده از ™Coizist به کمتر از ۱ دقیقه زمان نیاز دارد.
- ™Coizist برپایه روش های مورد تایید EPA می باشد.
- ™Coizist می تواند ۲۰% تا ۷۰% ارزان تر از روش های سنتی باشد.
- ™Coizist به طور همزمان coli و کلیفرم ها را در آب شناسایی می کند. رنگ آبی نمونه نتیجه متابولیزه شدن X-gal توسط کلیفرم ها بوده و رنگ فلورانس در اثر متابولیزه شدن MUG توسط E. coli ایجاد می شود. ™Coizist طی ۲۴-۱۸ ساعت قادر به شناسایی یک کلیفرم (CFU 1) در ۱۰۰ میلی لیتر نمونه دارای بیش از دومیلیون باکتری هتروفیلیک می باشد. این کیت همچنین دارای بازدارنده های رشد Aeromonas و Pseudomonas نیز می باشد.
شرایط نگهداری: در ۲۵-۲ درجه سانتی گراد و دور از نور نگهداری شود. نگهداری در دماهای پایین باعث طول عمر بیشتر محصول خواهد بود.
کار با کیت
کار با کیت
تلقیح نمونه
درب بطری ™Coizist را در شرایط استریل باز نموده و به آن ۱۰۰ میلی لیتر از نمونه آب مورد آزمایش بیافزایید.
نکته: درصورت کلرینه بودن آب مورد آزمایش، ۱۰۰ ماکرولیتر سدیم تیوسولفات (Sodium Thiosulfate) با غلظت ۳% به نمونه افزوده و حدود ۱۵ ثانیه به خوبی تکان داده شود. بطری را در انکوباتور ۳۵ درجه سانتی گراد به مدن ۲۴-۱۶ ساعت گرماگذاری نمونه و سپس نتایج خود را بررسی نمایید.
درصورت که نمونه های مورد آزمایش در دمای حدود ۲۵ درجه سانتی گراد نگهداری می شوند، آزمایش بایستی حداکثر طی ۶ ساعت انجام شود. در شرایط خاص می توان نمونه های را در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴ ساعت نگهداری کرد.
چنانچه نمونه های مورد آزمایش در دمای ۲۵-۲۰ درجه سانتی گراد گرماگذاری شوند، بایستی زمان گرماگذاری را تا ۴۸ ساعت افزایش داد.
درب ظرف را بسته و به خوبی تکان دهید تا مواد موجود در بطری حل شود.
کیت تلقیح شده را در دمای ۲ ± ۳۵ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴-۱۸ ساعت گرماگذاری نمایید.
نکات مرتبط با این روش
- چنانچه نمونه آب زمینه رنگی داشته باشد، نمونه تلقیح شده به ™Coizist باید با نمونه شاهد همان منبع آب مقایسه شود.
- ™Coizist جزء آزمایش های اولیه (Primary tests) آب می باشد که برای نمونه های غنی و یا تغلیظ شده به کار نمی رود.
- هنگام افزودن نمونه هایی با کلر فراوان به ™Coizist ممکن است تشعشع آبی رنگ مشاهده شود که در صورت ظهور چنین حالتی، نمونه معتبر نبوده و آزمایش باید متوقف شود.
- کار با ™Coizist باید در شرایط استریل و منطبق با اصول GLP انجام شود.
تفسیر آزمایش
- نتیجه منفی: هیچ تغییر رنگی در محیط کشت مشاهده نمی شود و رنگ محیط زرد باقی می ماند.
گاهی اوقات ممکن است باکتری در نمونه اصلی تحت شرایط استرس زا قرار گرفته و دچار چهش های ژنتیکی شده باشد. در این صورت ممکن است برخی از آنزیم های اختصاصی باکتری برای واکنش X-gal و MUG غیرفعال شده و تغییر رنگ محیط با فلورسنس مشاهده نشود و نتایج منفی کاذب به دست آید. در این صورت زرد بودن محیط بعد از ۲۴ ساعت بطور قطع بیانگر عدم وجود باکتری نمی باشد. برای اطمیینان از صحت نتایج باید پس از ۲۴ ساعت بر روی محیط های زرد رنگ تست ایندول انجام شود.
- توتال کلیفرم ها: هرگونه تغییر رنگ محیط از زرد به سبز-آبی که با تکان دادن کیت از بین نرود، حتی در قسمت های بالایی کیت، نشان دهنده وجود کلیفرم ها در نمونه و واکنش X-gal می باشد.
- E. coli: نمونه های تغییر رنگ داده شده را در مقابل نور UV قرار دهید. در محیطی تاریک، لامپ UV شش واتی دارای طول موج 366 نانومتر را از فاصله 4-3 سانتی متری به نمونه تابانده و نتایج را مشاهده نمایید. فلورسنس آبی کمرنگ نشان دهنده وجود باکتری های E. coli در نمونه و واکنش MUG می باشد.
اخطار: از تاباندن مستقیم نور UV به چشم و نمونه خودداری شود.
|
واکنش ایندول |
فلورسنس |
تغییر رنگ به سبز-آبی |
رشد |
ATCC |
میکروارگانیسم |
|
-
|
-
|
+
|
+
|
11775
|
E. coli
|
|
+
|
+
|
+
|
+
|
25922
|
E. coli
|
|
-
|
-
|
+
|
+
|
|
Total coliforms
|
|
-
|
-
|
-
|
+
|
14028
|
Salmonella typhimurium
|
|
-
|
-
|
-
|
+
|
11060
|
Shigella Sonnei
|
