iChrome Listeria (ALOA) | آی کروم لیستریا

محیط کشت کروموژن برای جداسازی و شناسایی لیستریا مونوسایتوژنز در نمونه های غذایی و بالینی

شماره کاتالوگ: ic27011

برای مطالعه بیشتر کلیک کنید: محیط های کروموژنیک و فلوئوروژنیک

توضیحات

 

محیط کشت لیستریا ALOA، یک محیط انتخابی برای جداسازی و شناسایی لیستریا مونوسایتوژنز در نمونه های غذایی و بالینی است. این محیط براساس محیط کشت Agosti & Ottaviani آماده شده است. این محیط برای تاییدیه پس از استفاده از محیط غنی کننده Fraser استفاده می شود. همچنین محیط توصیه شده در ISO-11290-1 برای شناسایی و شمارش لیستریا مونوسایتوژنز است.

استفاده از سوبسترای کروموژن برای شناسایی لیستریا باعث می شود تمامی سویه های لیستریا با رنگ آبی مشخص شوند. رشد ارگانیسم های دیگری که این آنزیم را دارند مانند انتروکوکسی ها، با عوامل مهارکننده داخل محیط و همچنین آنتی بیوتیک ها، مهار می شوند.

لیستریا مونوسایتوژنز برخلاف دیگر سویه های این باکتری، دارای فعالیت فسفولیپازی است. فعالیت افتراقی دیگری نیز توسط سوبسترای لیپاز C نشان داده می شود. فعالیت لیپاز، یک هاله کدر در اطراف کلنی های لیستریا مونوسایتوژنز ایجاد می کند.

ترکیب این دو سوبسترا به صورت همزمان تمایز کلنی های لیستریا مونوسایتوژنز از سایر سویه ها می شود. زیرا هرچند همه سویه ها به رنگ آبی دیده می شوند اما سویه مونوسایتوزنز با هاله کدر در اطراف کلنی مشخص می شود. سویه لیستریا ایوانووی که اغلب برای حیوانات و همچنین انسان ها پاتوژن است، نیز فعالیت لیپازی را نشان می دهد.

شرایط نگهداری

  • پودر را در دمای 30-15 درجه سانتی گراد و محیط آماده شده را در دمای 8-2 درجه سانتی گراد در فضای تاریک و در جای خشک نگهداری کنید.

 

آزمایش

آزمایش

 

  • 35.2 گرم از پودر را وزن کنید و به 500 میلی لیتر آب مقطر اضافه کنید. به خوبی مخلوط کنید.
  • به مدت 15 دقیقه در دمای 121 درجه سانتی گراد اتوکلاو کنید.
  • در شرایط استریل، یک ویال ساپلمنت iChrome Listeria را به محیط استریل و خنک شده تا دمای 50-45 درجه سانتی گراد اضافه کنید.
  • در شرایط استریل، 10 میلی گرم نالیدیکسیک ­اسید، 38350 واحد پلی میکسین بی، 10 میلی گرم سفتازیدیم و 5 میلی گرم آمفوتریسین به محیط اضافه کنید.
  • به خوبی مخلوط کنید و در پتری دیش های استریل بریزید.

 

شناسایی و شمارش لیستریا مونوسایتوژنز و سویه های لیستریا براساس ISO 11290

 

روش تشخیص

  • 25 گرم (25 میلی لیتر) از نمونه را وزن کنید و به 225 میلی لیتر براث Fraser با غلظت یک دوم اضافه کنید.
  • به خوبی مخلوط کنید و در 30 درجه سانتی گراد به مدت 1 ± 25 ساعت گرماگذاری کنید.
  • 1 میلی لیتر از این محیط را به 10 میلی لیتر محیط براث Fraser اضافه کنید. به مدت 2 ± 24 ساعت در 37 درجه سانتی گراد در شرایط هوازی گرماگذاری کنید.
  • با استفاده از محیط غنی کننده اولیه، سطح محیط ALOA (فاقد سوبسترای کروموژن) و یک محیط انتخابی دیگر مورد تشخیص آزمایشگاه را تلقیح کنید تا کلنی های مجزایی تشکیل شود.
  • با استفاده از محیط غنی کننده دوم، همین روند را تکرار کنید و سطح یک پلیت ALOA (فاقد سوبسترای کروموژن) و یک محیط انتخابی دیگر را تلقیح کنید.
  • پلیت ها را حداکثر به مدت 2 ± 48 ساعت گرماگذاری کنید.
  • کلنی های احتمالی را انتخاب کنید و آزمایش های تاییدی برای لیستریا مونوسایتوژنز و همچنین سایر سویه ها را انجام دهید.

 

روش شمارش

  • یک سوسپانسیون اولیه با نسبت 1 از نمونه : 10 از آب پپتونه بافری تهیه کنید. درصورتی که شناسایی و شمارش را همزمان انجام می دهید، محیط براث Fraser با غلظت یک سدوم می تواند به عنوان رقیق کننده استفاده شود.
  • 1 میلی لیتر از سوسپانسیون را بر روی سطح محیط کروموژن ALOA تلقیح کنید. به مدت 2 ± 24 ساعت در دمای 37 درجه سانتی گراد گرماگذاری کنید. اگر رشد میکروبی مشاهده نشد، یک 24 ساعت دیگر نیز گرماگذاری را ادامه دهید.
  • کلنی های احتمالی را انتخاب کنید و تست های تاییدی را برای لیستریا مونوسایتوژنز و سایر سویه ها انجام دهید.
  • تعداد کلنی های لیستریا مونوسایتوژنز یا سایر سویه ها را از کلنی های تایید شده محاسبه کنید.

 

 

پرسش و پاسخ

شما نیز میتوانید سوالات خود را ثبت کنید!

اگر سوالی در مورد محصول دارید از این قسمت بپرسید!

کنترل کیفی

 

کنترل کیفی

  • ظاهر محیط دهیدراته: بژ تیره، پودری و یکنواخت
  • ظاهر محیط آماده: کهربایی روشن و کدر
  • نتیجه رشد باکتری به مدت 24-18 ساعت در دمای 37-35 درجه سانتی گراد

 

 

رنگ کلنی بازیابی و رشد ATCC ارگانیسم
سبز-آبی با هاله اطراف
خوب
13932
Listeria monocytogenes
سبز-آبی بدون هاله اطراف
خوب
33090
Listeria innocua
-
مهار
8739
Escherichia coli
-
مهار
29212
Enterococcus faecalis
توضیحات

 

محیط کشت لیستریا ALOA، یک محیط انتخابی برای جداسازی و شناسایی لیستریا مونوسایتوژنز در نمونه های غذایی و بالینی است. این محیط براساس محیط کشت Agosti & Ottaviani آماده شده است. این محیط برای تاییدیه پس از استفاده از محیط غنی کننده Fraser استفاده می شود. همچنین محیط توصیه شده در ISO-11290-1 برای شناسایی و شمارش لیستریا مونوسایتوژنز است.

استفاده از سوبسترای کروموژن برای شناسایی لیستریا باعث می شود تمامی سویه های لیستریا با رنگ آبی مشخص شوند. رشد ارگانیسم های دیگری که این آنزیم را دارند مانند انتروکوکسی ها، با عوامل مهارکننده داخل محیط و همچنین آنتی بیوتیک ها، مهار می شوند.

لیستریا مونوسایتوژنز برخلاف دیگر سویه های این باکتری، دارای فعالیت فسفولیپازی است. فعالیت افتراقی دیگری نیز توسط سوبسترای لیپاز C نشان داده می شود. فعالیت لیپاز، یک هاله کدر در اطراف کلنی های لیستریا مونوسایتوژنز ایجاد می کند.

ترکیب این دو سوبسترا به صورت همزمان تمایز کلنی های لیستریا مونوسایتوژنز از سایر سویه ها می شود. زیرا هرچند همه سویه ها به رنگ آبی دیده می شوند اما سویه مونوسایتوزنز با هاله کدر در اطراف کلنی مشخص می شود. سویه لیستریا ایوانووی که اغلب برای حیوانات و همچنین انسان ها پاتوژن است، نیز فعالیت لیپازی را نشان می دهد.

شرایط نگهداری

  • پودر را در دمای 30-15 درجه سانتی گراد و محیط آماده شده را در دمای 8-2 درجه سانتی گراد در فضای تاریک و در جای خشک نگهداری کنید.

 

آزمایش

آزمایش

 

  • 35.2 گرم از پودر را وزن کنید و به 500 میلی لیتر آب مقطر اضافه کنید. به خوبی مخلوط کنید.
  • به مدت 15 دقیقه در دمای 121 درجه سانتی گراد اتوکلاو کنید.
  • در شرایط استریل، یک ویال ساپلمنت iChrome Listeria را به محیط استریل و خنک شده تا دمای 50-45 درجه سانتی گراد اضافه کنید.
  • در شرایط استریل، 10 میلی گرم نالیدیکسیک ­اسید، 38350 واحد پلی میکسین بی، 10 میلی گرم سفتازیدیم و 5 میلی گرم آمفوتریسین به محیط اضافه کنید.
  • به خوبی مخلوط کنید و در پتری دیش های استریل بریزید.

 

شناسایی و شمارش لیستریا مونوسایتوژنز و سویه های لیستریا براساس ISO 11290

 

روش تشخیص

  • 25 گرم (25 میلی لیتر) از نمونه را وزن کنید و به 225 میلی لیتر براث Fraser با غلظت یک دوم اضافه کنید.
  • به خوبی مخلوط کنید و در 30 درجه سانتی گراد به مدت 1 ± 25 ساعت گرماگذاری کنید.
  • 1 میلی لیتر از این محیط را به 10 میلی لیتر محیط براث Fraser اضافه کنید. به مدت 2 ± 24 ساعت در 37 درجه سانتی گراد در شرایط هوازی گرماگذاری کنید.
  • با استفاده از محیط غنی کننده اولیه، سطح محیط ALOA (فاقد سوبسترای کروموژن) و یک محیط انتخابی دیگر مورد تشخیص آزمایشگاه را تلقیح کنید تا کلنی های مجزایی تشکیل شود.
  • با استفاده از محیط غنی کننده دوم، همین روند را تکرار کنید و سطح یک پلیت ALOA (فاقد سوبسترای کروموژن) و یک محیط انتخابی دیگر را تلقیح کنید.
  • پلیت ها را حداکثر به مدت 2 ± 48 ساعت گرماگذاری کنید.
  • کلنی های احتمالی را انتخاب کنید و آزمایش های تاییدی برای لیستریا مونوسایتوژنز و همچنین سایر سویه ها را انجام دهید.

 

روش شمارش

  • یک سوسپانسیون اولیه با نسبت 1 از نمونه : 10 از آب پپتونه بافری تهیه کنید. درصورتی که شناسایی و شمارش را همزمان انجام می دهید، محیط براث Fraser با غلظت یک سدوم می تواند به عنوان رقیق کننده استفاده شود.
  • 1 میلی لیتر از سوسپانسیون را بر روی سطح محیط کروموژن ALOA تلقیح کنید. به مدت 2 ± 24 ساعت در دمای 37 درجه سانتی گراد گرماگذاری کنید. اگر رشد میکروبی مشاهده نشد، یک 24 ساعت دیگر نیز گرماگذاری را ادامه دهید.
  • کلنی های احتمالی را انتخاب کنید و تست های تاییدی را برای لیستریا مونوسایتوژنز و سایر سویه ها انجام دهید.
  • تعداد کلنی های لیستریا مونوسایتوژنز یا سایر سویه ها را از کلنی های تایید شده محاسبه کنید.

 

 

پرسش و پاسخ

شما نیز میتوانید سوالات خود را ثبت کنید!

اگر سوالی در مورد محصول دارید از این قسمت بپرسید!

کنترل کیفی

 

کنترل کیفی

  • ظاهر محیط دهیدراته: بژ تیره، پودری و یکنواخت
  • ظاهر محیط آماده: کهربایی روشن و کدر
  • نتیجه رشد باکتری به مدت 24-18 ساعت در دمای 37-35 درجه سانتی گراد

 

 

رنگ کلنی بازیابی و رشد ATCC ارگانیسم
سبز-آبی با هاله اطراف
خوب
13932
Listeria monocytogenes
سبز-آبی بدون هاله اطراف
خوب
33090
Listeria innocua
-
مهار
8739
Escherichia coli
-
مهار
29212
Enterococcus faecalis

CoA & MSDS files

Downloading CoA & MSDS files

 
 

:To download the CoA file

Enter the LOT number printed on the container

:To download the MSDS file

Enter the catalog number (REF) printed on the container without the hyphen